前言

      無(wú)論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤，一旦生長(zhǎng)直徑超過1~2 mm，都會(huì)有血管生成。這是由于腫瘤細(xì)胞自身可分泌多種生長(zhǎng)因子，誘導(dǎo)血管生成。多數(shù)惡性腫瘤的血管生成密集且生長(zhǎng)迅速。因此，血管生成在腫瘤的發(fā)展轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用，抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發(fā)展和擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。于是體外的血管生成實(shí)驗(yàn)就能很好的模擬腫瘤的血管發(fā)生過程，并且適合研究藥物對(duì)這一過程的影響實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)以HUVEC細(xì)胞為例，介紹這一實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)過程。

    圖1   培養(yǎng)皿底部帶計(jì)數(shù)格坐標(biāo)

圖2   培養(yǎng)皿底部計(jì)數(shù)格的示意圖

步驟：找到感興趣的細(xì)胞后，記下細(xì)胞的坐標(biāo)信息（橫坐標(biāo)是字母，縱坐標(biāo)是數(shù)字），下次再觀察時(shí)，根據(jù)坐標(biāo)信息找到細(xì)胞的位置，即可繼續(xù)觀察同一個(gè)細(xì)胞。

拓展應(yīng)用：

1.底部的計(jì)數(shù)格可直接用于細(xì)胞計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)細(xì)胞無(wú)需轉(zhuǎn)移到計(jì)數(shù)板了；

圖3  邊長(zhǎng)500微米的計(jì)數(shù)格

圖4  邊長(zhǎng)50微米的計(jì)數(shù)格

2.鎖定感興趣的細(xì)胞，直接在培養(yǎng)皿里做免疫熒光實(shí)驗(yàn)

圖5   小鼠免疫熒光染色效果（使用ibidi 35毫米培養(yǎng)皿的實(shí)驗(yàn)效果）

如何選擇不同規(guī)格的計(jì)數(shù)格培養(yǎng)皿／載玻片？
根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膩恚?br />

＊指倒置熒光顯微鏡，共聚焦顯微鏡等顯微鏡
＊＊使用玻璃底的產(chǎn)品還可以有配套的蓋子進(jìn)行DIC活細(xì)胞成像